Instruções de funcionamento do cartão de ensaio rápido de aflatoxina B1

Cartão de teste rápido de aflatoxina B1

instruções de funcionamento

(Método do ouro coloidal)

1Princípio e aplicação

Este produto é fabricado pelo princípio da imunocromatografia de ouro coloidal de inibição competitiva e é utilizado para detectar o Aspergillus flavus B1 (AFB1) em animais.As amostras são retiradas do local de ensaio.

Após a solução da amostra ter sido colocada no buraco de adição da amostra do cartão de detecção, o Aspergillus flavus B1 na solução da amostra é combinado com o anticorpo marcado com ouro,impedindo assim que o anticorpo marcado com ouro se combine com o conjugado do Aspergillus flavus B1 na membrana da celuloseQuando o teor de Aspergillus flavus B1 na solução da amostra for superior ao limite de detecção, a linha de detecção não apresenta cor e o resultado é positivo;Quando o teor de Aspergillus flavus B1 na solução da amostra for inferior ao limite de detecção, a linha de detecção aparecerá de vermelho-púrpura e o resultado será negativo.

2Indicadores técnicos

2.1 Sensibilidade do cartão de reagente: 2 ppm (ng/ml)

O limite de detecção final da amostra deve ser determinado multiplicando a sensibilidade da placa de reagente pela razão de diluição do tratamento da amostra.

2.2 Limite inferior de detecção da amostra:

Cereais, alimentos para animais, cereais e óleo...... 20 ppm

Cereais, alimentos para animais (deverão ser secos por sopro)...... 5 ppm

3Composição do kit

Cartão de detecção: 40 peças/caixa

Instruções: 1 exemplar

4Equipamento e reagentes necessários

4.1 Instrumentos: homogeneizador, oscilador, centrífuga, pipeta graduada, balança (sensibilidade 0,01 g)

4.2 Micropipeta: canal único 20 μl-200 μl, 100 μl-1000 μl

4.3 Reagente: metanol, n-hexano

5. Pré-tratamento da amostra

5.1 Instruções antes do tratamento das amostras:

O equipamento experimental deve estar limpo e utilizar uma cabeça de sucção descartável para evitar contaminação e interferência com os resultados experimentais.

5.2 Preparação:

Solução 1: Solução de extracção da amostra

70% de metanol, ou seja, V metanol: V água deionizada=7:3.

5.3 Etapas de pré-tratamento da amostra:

5.3.1 Cereais e alimentos para animais

1) Pesar 2 g de amostra triturada num tubo de centrífuga e adicionar solução de extracção de amostra de acordo com os diferentes requisitos de limite de detecção do quadro seguinte

Agitar durante 5 minutos a temperatura ambiente de 4000 rpm/coração de separação durante 5 minutos.

Pegue 0,1 ml de supernatante, adicione 0,4 ml de água deionizada e misture bem para uso posterior.

5.3.2 Cereais e alimentos para animais (devem ser secos a sopro)

Se for necessário que o limite inferior de detecção seja de 5 pppb, podem ser realizadas as seguintes operações:

1) Pesar 2 g de amostra triturada num tubo de centrífuga, adicionar 4 ml de solução de extracção de amostra, agitar durante 5 minutos e separar à temperatura ambiente de 4000 rpm durante 5 minutos;

2) Tomar 1 ml do líquido superior e secá-lo com nitrogénio ou ar a 50-60 °C;

3) Em primeiro lugar, adicionar 0,25 ml de metanol 70% para dissolver o resíduo restante e agitar vigorosamente durante 2 minutos; Adicionar outro 1 ml de água desionizada e misturar bem para uso posterior. (Nota:A ordem de adição do metanol e da água nesta etapa não pode ser revertida)

5.3.3 Cereais e óleos (óleo vegetal, óleo de gergelim, óleo de salada, óleo de amendoim, etc.)

1) Pesar 2 g da amostra num tubo de centrífuga e adicionar a solução de extracção da amostra de acordo com os diferentes requisitos de limite de detecção do quadro seguinte.

Adicionar 8 ml de n-hexano, agitar durante 5 minutos e separar a temperatura ambiente de 4000 rpm durante 5 minutos.

Retirar o líquido superior, retirar 0,1 ml do líquido inferior e adicionar 0,4 ml de água deionizada, misturar bem e colocar de lado.

6.Passos experimentais

6.1 Abrir o saco de embalagem de papel de alumínio do cartão de inspecção, retirá-lo e colocá-lo numa mesa plana e limpa.

6.2 Succionar o líquido da amostra preparada com uma pipeta correspondente e soltar lentamente 2-3 gotas (cerca de 60 ml) num buraco (S) da amostra (devem ser evitadas espumas).

6.3 Deixar a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para determinar os resultados; os resultados superiores a 10 minutos só podem ser utilizados como referência.

7Julgamento do resultado

Negativo: as linhas C e T apresentam cor, indicando que a concentração na amostra está abaixo do limite de detecção ou não contém.

Positivo: a linha C mostra vermelho, enquanto a linha T não mostra cor, indicando que a concentração na amostra está acima do limite de detecção.

Inválida: a ausência de uma linha C de controlo de qualidade indica um processo de funcionamento incorreto ou uma avaria do cartão de detecção.

Negativo positivo inválido

8Precauções

8.1 Não podem ser utilizados produtos que tenham caducado ou que tenham danificado sacos de papel de alumínio.

8.2 Ao retirar o cartão de detecção do frigorífico, deve ser restaurado à temperatura ambiente antes de ser aberto.O cartão de detecção aberto deve ser utilizado o mais rapidamente possível para evitar falhas devido à humidade..

8.3 Não toque na superfície de filme branco situada no centro do cartão de detecção.

8.4 Não se devem misturar os gotas para evitar a contaminação cruzada.

8.5 A solução da amostra a ensaiar deve ser transparente, isenta de partículas turvas e de contaminação bacteriana,Caso contrário, pode provocar fenômenos anormais, tais como bloqueio e desenvolvimento de cores pouco claras., o que pode afectar o julgamento dos resultados experimentais.

9. Armazenagem e prazo de validade

Condições de armazenagem: o kit de reagente deve ser armazenado num ambiente seco a 2-30 °C.

Prazo de validade: O produto tem um período de validade de 1 ano e a data de produção pode ser encontrada na embalagem.